在日常细胞实验中,我们经常需要计算细胞浓度,以进一步确定接种浓度或细胞数量。尽管自动细胞计数仪提供了快速性,但对于某些细胞,尤其是那些处于复杂状态的细胞,有研究表明其分析性能并不一致[1](对于细胞形态的识别,所采用的是不一样的方法)。
在临床实践中,因血细胞自动计数仪通常无法精准地识别细胞形态,所以需使用经典的血细胞计数板进行仪器校准。利用显微镜手动进行细胞计数,这种方法已经被广泛认可[2]。
血细胞计数板规格及计数原理
血细胞计数板是一种经典的细胞计数工具,具有上下两个计数池。
在其上方覆盖盖玻片,形成深度为0.10mm的计数池。每个计数池分为9个大格,每个大格的规格为1.00mm×1.00mm。因视野所限,不易操作,容易造成较大误差,所以一般采用定点(计数室4个角的大方格)取样计数。(直径较小的细胞如红细胞,采用中间一个大方格内标准5个区域采集计数)
细胞浓度=(四个大方格的细胞数之和)/4×稀释倍数×104个Cell/mL
博大博聚细胞计数仪的计数之道
博大博聚细胞计数仪,沿用经典血细胞计数板的计数原理进行研制(JJG 552-1988 血细胞计数板试行检定规程),并可搭载一次性细胞计数片,其细胞计数片与标准血细胞计数板的计数池高度相同。
①在使用血细胞计数板计数时,仪器相当于一个自带电脑的自动化显微成像系统,屏幕能够提供细胞高清图像的实时预览,精密的三轴联动控制系统,实现目标视野的精准走位,实时自动调焦,保证图片的清晰度,并通过算法自动进行识别与计数。
②在使用一次性细胞计数片时,仪器屏幕会显示虚拟刻线,刻线对应的实际大小经“仿细胞校准板(发明专利号:ZL 2020 21855359.4)”严格标定,与血细胞计数板上的刻线面积(1*1mm2)一致。
③一次性细胞计数片的空腔高度设计严格标定为0.1mm,计数体积(0.1mm3)与血细胞计数板一致。
④在两种耗材上,博大博聚细胞计数仪都采用标准的浓度计算公式,细胞浓度=(四个大方格的细胞数之和)/4×稀释倍数×104个Cell/mL。这使得博大博聚计数仪能够实现计数结果人工核对。
博大博聚的细胞计数新范式
博大博聚细胞计数仪支持非染色(发明专利号ZL 2013 1 0101403.0)、台盼蓝染色和荧光染色等多种计数模式。仪器预设多种细胞样本类型,对于更复杂的细胞样本,可通过自定义辅助判读,以寻找最适合不具代表性样本的识别参数并可无限新增。
无论是秉持传统方法还是融合创新思路,博大博聚计数仪都旨在为细胞计数和分析提供更全面的解决方案。
参考文献:
[1] .Borzova E. The Absolute Basophil Count. Methods Mol Biol. 2020;2163:109-124.
[2] Zhang M, Gu L, Zheng P, et al. Improvement of cell counting method for Neubauer counting chamber. J Clin Lab Anal. 2020;34:e23024.